Colorazione di Papanicolaou

Myttex Forum ha chiuso definitivamente. Non è più possibile inviare messaggi, ma il contenuto è ancora consultabile in questo archivio.

Dott.MorenoZolghetti

2010-07-28 18:50

La colorazione di Papanicolaou è una colorazione molto utilizzata nella citologia (studia le cellule libere, non organizzate in tessuto).

Un classico esempio di utilizzo è il PAP test con il quale si mettono in evidenza cellule cancerose nei campioni ricavati da "raschiamento" delle pareti vaginali e uterine (in particolare nel collo dell'utero). Tale test, di importanza assoluta per la diagnosi precoce del tumore della cervice uterina è raccomandato a tutte le donne, dal primo rapporto sessuale in avanti.

La colorazione di Papanicolaou è adatta a mettere in evidenza anomalie nucleari, citoplasmatiche o morfologiche in generale. Viene utiizzata anche per la citologia del cavo orale, la citologia urinaria e dei liquidi seminali, del secreto prostatico.

Propongo qui una metodica semplificata, modificata rispetto al metodo originale.

Il materiale su cui si opera può essere semplicemente ottenuto per "grattamento" della mucosa orale, usando un cucchiaino passato in corrispondenza delle guance.

Il materiale raccolto è disteso su di un vetrino portaoggetto e lasciato asciugare all'aria.

Procedimento

Porre il vetrino per 5-15 min in una miscela di etanolo assoluto-etere etilico anaparti (fissazione).

Passare in etanolo 96%, poi in etanolo 75%, poi in etanolo 50%.

Passare in acqua distillata.

Ciascun passaggio dura un minuto.

Porre il vetrino in ematossilina di Harris per 2-3 minuti.

Sciacquare in acqua di fonte (minerale naturale) per 10 minuti.

Porre in etanolo 50%, poi etanolo 75%, poi in etanolo 96%.

Ciascun passaggio dura un minuto.

Colorare per 2 min con arancio II.

Lavare in etanolo 96% immergendo il vetrino 2-3 volte.

Passare in soluzione policroma EA50 per 1-2 minuti.

Lavare in etanolo 96% per 2-3 minuti.

Passare in etanolo assoluto per 5 minuti.

Chiarificare in miscela xilene-etanolo anaparti per 5 minuti.

Passare in xilene e montare con montante acrilico.

Osservando al microscopio si noteranno:

nuclei: blu, violetto o bruno

citoplasmi cianofili: verde-blu

citoplasmi eosinofili: rosa

eritrociti: rossi

cellule cheratinizzate: da rosa ad arancio.

I seguenti utenti ringraziano Dott.MorenoZolghetti per questo messaggio: Max Fritz, quimico, RhOBErThO