Max Fritz
2012-05-30 18:05
Non spendo parole sul colesterolo perchè quimico ne aveva già parlato (http://myttex.net/forum/Thread-Steroidi?highlight=steroidi) sicuramente in maniera più accurata di quanto potrei fare io. Lascio al solito alla fine le considerazioni Reagenti: -Anidride acetica -Cloroformio -Acido solforico concentrato -Una fonte di colesterolo (ad es. un tuorlo d'uovo sodo). Procedura: Il tuorlo sodo di un uovo viene posto in un mortaio e miscelato con 25mL di cloroformio: in questo modo gran parte del colesterolo, insieme ad altre sostanze, si solubilizzerà nel solvente alogenato. Si procede alla filtrazione, per ottenere una soluzione limpida. 5mL del liquido così ottenuto vengono versati in una provetta e accuratamente miscelati con 3mL di anidride acetica (non si osserva alcun cambiamento). Si procede dunque con l'aggiunta di 3-5 gocce di acido solforico concentrato (96-98%), facendolo colare lungo le pareti della provetta. Si nota un'immediata colorazione blu-verde, che pian piano si intensifica, fino a raggiungere una tonalità verde smeraldo molto molto scura: Osservazioni: La reazione avviene in diverse fasi: in ambiente fortemente acido, l'anidride acetica acetila il colesterolo (sull'-OH dell'anello A), successivamente avviene una deacetilazione con formazione di un doppio legame. Questa nuova molecola tende a formare dimeri e poi altri polimeri, che sono i responsabili della caratteristica colorazione. Una versione quantitativa del test (che andrà in tal caso eseguito con una procedura specifica di altro tipo) prevede l'utilizzo di uno spettrofotometro per valutare la colorazione e dedurne la concentrazione iniziale di colesterolo nel campione in esame. Una stranezza che ho notato è stato il trasferimento del pigmento giallo del tuorlo al cloroformio in maniera così intensa: qualcuno sa qual è la molecola che dà quel colore? Per ulteriori informazioni: http://www.clinchem.org/content/20/7/794.full.pdf
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