Colorazioni Batteriche

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Alle94

2011-11-15 16:51

Propongo alcune colorazioni batteriche un pò più curiose del solito :-P

Colorazione della CAPSULA (colorazione negativa)

- Colorazione con eosina

I batteri appaiono colorati in violetto, le capsule in rosa-rosso

PROCEDIMENTO

1) Fissare lo striscio alla fiamma o in alcol etilico assoluto

2) Colorare per 2-3 minuti con violetto di genziana fenicato

3) Decolorare per qualche secondo con una soluzione alcol etilico-acetone

4) Lavare e colorare per pochi secondi con una soluzione alcolica di eosina 0,5%

- Colorazione con inchiostro di china

Le capsule appaiono bianche spiccando su sfondo nero

PROCEDIMENTO

1) Stemperare la colonia su una goccia di inchiostro di china Pelikan 541 per uso batteriologico, diluito al 10% con acqua distillata

2) Coprire con un vetrino coprioggetto ed esaminare al microscopio con l'obbiettivo ad immersione 100x

Colorazione dei FLAGELLI

I flagelli appaiono colorati in rosso

Occorre preparare la seguente soluzione (miscelare i vari ingredienti nell'ordine descritto) :

- Soluzione satura di KAl(SO4)2 * H2O oppure di NH4Al(SO4)2 * 12 H2O 20ml

- Soluzione 20% acido tannico 10ml

- Acqua distillata 40 ml

- Etanolo 95% 15ml

- Soluzione satura di fucsina basica in etanolo 95% 3ml

PROCEDIMENTO

1) Pulire e sgrassare bene i vetrini e poi passare più volte alla fiamma

2) Allestire lo striscio con un'ansata di campione

3) Ricoprire il vetrino con la soluzione precedentemente preparata e lasciare a contatto per 10 minuti a temperatura ambiente

4) Lavare con acqua distillata

5) Asciugare ed esaminare al microscopio

Colorazione delle SPORE

- Colorazione di Schaeffer-Fulton

Le spore, all'interno del corpo batterico o isolate, appaiono colorate in verde ed i corpi bacillari in rosso

PROCEDIMENTO

1) Ricoprire lo striscio fissato con la soluzione di verde malachite (5% in acqua distillata) e mantenerlo sopra la fiamma per 30 secondi fino allo sviluppo dei primi vapori

2) Lavare accuratamente con acqua distillata

3) Colorare con safranina (0,5% soluzione idroalcolica) per 30 secondi

4) Lavare e asciugare

- Colorazione di Möller

Le spore compaiono colorate in rosso su sfondo azzurro

PROCEDIMENTO

1) Immergere lo striscio in una soluzione acquosa di acido cromico al 5% per 2 minuti

2) Lavare con acqua distillata

3) Colorare con fucsina fenicata fino a svolgimento dei vapori

4) Passare in una soluzione di acido solforico al 5% fino a scomparsa del colore rosso

5) Lavare con acqua distillata

6) Colorare con una soluzione acquosa di blu di metilene

7) Lavare con acqua distillata ed asciugare

8) Montaggio in balsamo

Spero di esservi stato di aiuto Rolleyes